O Kit de paternidade e DNA é um kit de PCR multiplex de curta duração (STR) que inclui 13 locos CODIS STR (D3S1358, D5S818, D7S820, D8S1179, D13S317, D16S539, D18S51, D21S11, CSF1PO, FGA, TH01, TPOX e vWA), 5 loci STR de padrão europeu (D1S1656, D2S441, D10S1248, D12S391 e SE33) e determinação do sexo locus Amelogenin. Os iniciadores de PCR do Kit de paternidade e DNA foram concebidos para gerar produtos entre 75 e 420 pb. etiquetado com corantes fluorescentes azuis, verdes, amarelos e vermelhos.
Os padrões fornecidos com o kit são rotulados com corante laranja e contêm 23 fragmentos de DNA de 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 220, 230, 240, 260, 280, 300, 320, 340, 360, 380, 400, 420, 440 e 450 pb.
Todos os componentes do Kit de paternidade e DNA, exceto a solução ativadora, são fornecidos em formato, que permite o armazenamento do kit em temperatura ambiente por um ano sem perda de sensibilidade. A mistura principal de PCR liofilizada inclui iniciadores e polimerase de início a quente e é aliquotada em 0,2 mL. Tubos de reação por PCR. Os componentes da reação são ativados pela adição de 5 μL de solução ativadora para cada tubo. Para um volume final de PCR de 25 μL, até 20 μL de solução de DNA podem ser adicionados por reação.
Perfis STR completos podem ser gerados a partir de apenas 100 pg de DNA genômico não degradado em tamanho grande (25 μL) reação de PCR. O Kit de paternidade e DNA é muito robusto e pode gerar excelentes resultados a partir de 6 μL PCR reações. Perfis STR completos podem ser gerados a partir de apenas 25 pg de DNA genômico não degradado em uma reação de PCR de 6 μL. O Kit de paternidade e DNA permite a amplificação direta de extratos não purificados de Chelex TE-Chelex de swabs bucais.
O Kit de paternidade e DNA contém um Controle Interno que pode ajudar a avaliar a presença de inibidores de PCR: a mistura principal liofilizada contém um conjunto de primers marcados com corante azul que amplificarão o produto de peso (400 – 440 pb) cuja presença e altura de pico se correlacionam com a pureza do DNA a extrair. O Kit de paternidade e DNA é compatível com os Analisadores Genéticos ABI PRISM® 310, 3100, 3130 e 3500 e outras.
